TBA-80FR・NEOによるBFP(Basic fetoprotein)測定法の検討
○多田達史1)，梶川達志1)，田港朝彦2)
1)香川医科大学医学部附属病院検査部，
2)同臨床検査医学
【目的】
BFP(Basic fetoprotein)は，胎児の血清，腸および脳組織から抽出された分子量55kDの癌胎児関連塩基性蛋白である。BFPは腫瘍マーカーとして血清および尿が用いられている。尿中BFPは尿路上皮癌，とくに膀胱癌に特異性の高い腫瘍マーカーとして注目されるようになった。BFPの測定方法としては，RIA法，EIA法，LIA法などが主流である。しかし，これらの方法は測定時間が長時間であったり，専用機器が必要である。そこで今回我々は，LIA法に使用しているラテックス試薬を用いて，汎用機器への適用を試みた。
【方法】
分析装置にはTBA-80FR・NEO（アボット東芝），測定試薬はLX試薬'栄研'BFP（栄研化学）を用いた。比較対照法として専用機器のLX-2200(栄研化学）を用いて同試薬で検討した。
- 測定原理
- 抗BFPマウスモノクローナル抗体感作ラテックスと検体中BFPが反応し，ラテックス粒子が凝集する。この時の吸光度を波長660nmで測定し，BFP濃度を求めた。
- 測定方法
- 尿検体45μlと緩衝液200μlを分注後，37℃で5分間インキュベーションし，抗BFPマウスモノクローナル抗体感作ラテックスを61μl加え，5分間の吸光度変化量をエンドポイント測定した。キャリブレーションは6ポイントのスプラインカーブで行った。
- 測定法の比較評価
- 2つの方法の比較については，Passing-Bablok regression（統計ソフト：analyse-it,Analyse-It Software, Ltd.Excel97version 以下PBrと略す)を用いて，傾き，切片，95%confidence interval(以下CIと略す)を求めた。
【結果】
- 測定精度：同時再現性(n=10)は2濃度(平均13.5，20.1ng/ml)の患者尿を用いて検討した。本法のCV(%)は，それぞれ6.29，3.67であった。日差再現性(n=6)も2濃度(12.9，20.7ng/ml)の患者尿を用いて検討した結果，CV(%)はそれぞれ10.62，7.22%であった。
- 希釈直線性：高BFP尿を専用希釈液で希釈して検討した。本法は少なくとも200ng/mlまで原点を通る直線性を示した。
- 共存物質の影響：患者検体（20ng/ml）を用いて検討した(尿9容に対して共存物質1容の割合で添加)。グルコース2,000mg/dl，クレアチニン400mg/dl，アスコルビン酸500mg/dl，トルエン10ml/l，NaClは1,000mg/dlまで影響は認められなかった。
- 検出限界の検討：低濃度標品の希釈したものをそれぞれ5重測定し，その平均値の±2.6SDを求め，ゼロ濃度と重ならない濃度を検出限界とした。その結果，本法の検出限界は9.6ng/mlであった。5)他法との相関：本法(Y)と専用機器のLX-2200(X)との相関をPBrで検討した(n=40)。回帰式はy=0.985x+0.138(傾きのCI:0.967?1.007,切片のCI:-0.956?0.687)，相関係数0.996となった(Fig.1)。
【結語】
本法は専用機器との相関も良好で，簡便にBFPを測定できる。しかし，反応検出感度が汎用機では低く，より再現性・検出限界を向上する検討が必要であると考えられる。
